Index
ورود کاربر
Telegram RSS ارسال به دوستان نسخه چاپی ذخیره خروجی XML خروجی متنی خروجی PDF
کد خبر : 141752
تاریخ انتشار : 5 بهمن 1388 0:0
تعداد مشاهدات : 2

به همت محققان ایرانی

جداسازي سلول هاي بنيادي از مغز استخوان موش با موفقیت انجام شد

محققان نانوفن آوري دانشگاه علوم پزشكي شهيد بهشتي با ابداع روشي جديد موفق به جداسازي سلول هاي بنيادي مزانشيمي از مغز استخوان موش شدند...
خبرگزاري دانشجويان ايران - تهران: محققان نانوفن آوري دانشگاه علوم پزشكي شهيد بهشتي با ابداع روشي جديد موفق به جداسازي سلول هاي بنيادي مزانشيمي از مغز استخوان موش شدند. صمد ندري، دانشجوي دكتري نانوفن آوري دانشگاه علوم پزشكي شهيد بهشتي و مجري طرح با اعلام اين مطلب به خبرنگار پژوهشي خبرگزاري دانشجويان ايران (ايسنا) اظهار كرد: سلول هاي بنيادي مزانشيمي به عنوان يک منبع ايده آل براي سلول درماني، ژن درماني و به عنوان ابزاري براي درمان بيماري هاي مادرزادي محسوب مي شوند و همچنين گزارش هايي مبني بر استفاده از اين سلول ها در مدل هاي حيواني براي درمان نواقص استخواني، جراحات نخاعي، سکتة مغزي و پارکينسون وجود دارد. تا به حال سلول هاي بنيادي مزانشيمي از مغز استخوان پستانداراني مثل رت، گربه، سگ، بابون، خرگوش، خوک، بز و گوسفند با موفقيت جداسازي و ويژگي هاي آن ها مورد بررسي قرار گرفته اما به علت رشد و تکثير ناخواسته سلول هاي غيرمزانشيمي و خوني در جريان كشت سلول هاي مغز استخوان موش، جداسازي و خالص سازي سلول هاي بنيادي مزانشيمي آن بسيار مشکل تر از انسان و ديگر گونه ها است. محقق برگزيده جشنواره بين المللي رازي در خصوص ويژگي هاي اين سلول ها افزود: از ويژگي هاي منحصر به فرد سلول هاي بنيادي مزانشيمي که از آن در جداسازي استفاده شده است، توانايي چسبيدن به پلاستيک است. به كارگيري اين ويژگي در جداسازي سلول هاي بنيادي مزانشيمي گونه هاي مختلف پستانداران به جز موش با موفقيت همراه بوده است كه با بهينه سازي روش چسبيدن به سطح ظرف پلاستيكي، جمعيت هموژن سلول هاي بنيادي مزانشيمي از مغز استخوان موش جداسازي شد و اساس اين روش بر تعويض مداوم محيط کشت بلافاصله پس از كشت سلول هاي مغز استخوان و کاهش زمان در معرض قرار گرفتن سلول ها با تريپسين در هنگام پاساژ دادن است. ندري ضمن اشاره به اين كه جداسازي سلول هاي فيبروبلاستي خالص از مغز استخوان موش به يک مسألة حل نشده در تحقيقات سلول هاي بنيادي مزانشيمي موشي تبديل شده است، تصريح كرد: اما در اين بررسي روش نوين و جديدي براي جداسازي سلول هاي مزانشيمي موشي ارائه شده است و اساس اين پروتکل بر تعويض سريع و مداوم محيط کشتFrequent Medium Change) FMC) در ساعات اوليه از کشت سلول هاي مغز استخوان موش و کاهش زمان تريپسنه کردن سلول ها در هنگام پاساژ دادن است. پژوهشگر برگزيده جشنواره بين المللي رازي در رابطه با چگونگي كشت اين سلول ها خاطرنشان كرد: سلول هايي كه به مدت سه هفته در معرض محيط هاي استخوانساز و چربي قرار گرفته بودند با رنگ آميزي اختصاصي آليزارين رد ( براي تمايز به استخوان) و اويل رد ( براي چربي ) مورد ارزيابي قرار گرفتند. در محيط تمايز به استخوان سلولهاي كشت شده با روش FMC مناظر نودول مانند بيشتري در مقايسه با روش WFMC مشاهده شد وهمچنين در محيط تمايز به چربي سلول هاي كشت شده با روش FMC قطرات چربي بيشتري در مقايسه با روش WFMC مشاهده شد. ندري در ادامه افزود: جداسازي و خلوص سلول هاي بنيادي مزانشيمي موشي به علت تعداد کم سلول هاي مزانشيمي در مغز استخوان و رشد ناخواستة سلول هاي غيرمزانشيمي به مراتب مشکل تر از ديگر گونه هاي جانوري است و نهايتا توانستيم سلول هاي شبه فيبروبلاست دوکي شکل با استفاده از تغيير مداوم محيط کشت در ساعات اولية کشت از مغز استخوان موش Balb/c جدا كنيم . وي با اشاره به اين كه سلول هاي چسبندة مشتق از مغز استخوان انواع مختلفي دارد اظهار كرد: فيبروبلاست ها، سلول هاي اجدادي خوني، ماکروفاژها، سلول هاي اندوتليالي و چربي از سلول هاي مغز استخواني اند كه باقي ماندن در سير كشت سلول ها باعث آلوده سازي سلول هاي فيبروبلاستي مي شوند و ما توانستيم با تعويض پي در پي محيط کشت مانع از چسبيدن سلول هاي غيرمزانشيمي و سلول هاي خوني به پليت پلاستيکي شويم . ندري در خصوص روش انجام اين طرح به ايسنا گفت: مجموعة خالص از سلول هاي شبه فيبروبلاستي با توانايي تکثير بالا و توان تمايز به دودمان هاي مزانشيمي در دو هفته بعد از کشت اوليه به دست آمد كه تمايز به استخوان از روي قرمز شدن ماتريکس معدني شده (رنگ آميزي اليزارين رد) و تمايز به چربي از قرمز شدن قطرات چربي موجود در سيتوپلاسم سلول ها (رنگ آميزي اويل رد) نمايان شد و در مجموع عدم بيان ماركرهاي شاخص سلول هاي خوني، مورفولوژي دوكي شكل سلول ها كلونوژنيك بودن و توان تكثير بالا و تمايز به دودمان هاي مزانشيمي ( استخوان و چربي) ما را متقاعد ساخت كه سلولهاي بدست آمده در اين مطالعه جمعيت خالص از سلول هاي بنيادي مزانشيمي باشند. وي در گفت و گو با ايسنا اضافه كرد: از جنبه هاي ناشناخته در مورد سلول هاي بنيادي مزانشيمي موشي، معرفي آنتي ژن ( ماركر) سطحي ويژه اين سلولها است و همچنين گزارش هاي پيشين نشان مي دهد كه محققان در مورد ماركر سطحي اين سلولها اختلاف نظر دارند كه ما در اين بررسي ماركر هاي CD44, CD90, Sca-1 در حد قابل توجهي بيان كرديم. هرچند اين ماركرها به عنوان ماركر سلولهاي غير خوني، اندوتليال و سلول هاي خوني مطرح مي باشند اما با اين وجود به نظر مي رسد كه بعضي از ماركرهاي شناخته دودمان هاي سلول هاي اندوتليالي و خوني در سلول هاي بنيادي مزانشيم موشي بيان شوند. ندري در پايان تصريح كرد: با اين مکانيسم که در نوع خود بسيار ساده و کم هزينه مي باشد در کوتاه ترين زمان ممکن از خاصيت چسبندگي سلول هاي بنيادي مزانشيمي و تعويض مداوم محيط كشت در آغازين ساعات كشت سلول هاي مغز استخوان موش براي تخليص سلول هاي دوکي بنيادي مزانشيمي استفاده شد.